CHO K1 HCP ELISA Kit (einstufiger ELISA)

Dieses Kit verwendet einen Festphasen-Enzym-verknüpften Immunosorbens-Assay (ELISA), der eine Doppelantikörper-Sandwich-Technik verwendet, um verbleibende Wirts zell proteine (HCPs) zu quantifizieren, die von der CHO-K1 zelllinie stammen.

Ein für CHO-K1 HCPs spezifischer polyklonaler Schaf antikörper wurde im Assay verwendet, um alle verbleibenden HCPs in den Proben einzufangen. Kalibrierung standards oder Test proben wurden zusammen mit dem HRP-markierten anti-CHO-K1 HCP-Antikörper gleichzeitig der Mikro titer platte zugesetzt, die mit dem affinität gereinigten Einfang antikörper vor beschichtet war, gefolgt von Inkubation und Waschen. TMB-Substrat (3,3 ',5,5'-Tetra methyl benzi din) wurde der Reaktion zugesetzt und durch die HRP-Oxidation katalysiert, um ein blau gefärbtes Produkt zu erzeugen (maximaler Absorptions peak bei 655 nm). Dann wurde die Stop-Lösung hinzugefügt, um die enzymatische Reaktion zu beenden, was zu einem gelb gefärbten Produkt (maximaler Absorptions peak bei 450 nm) führte. Die Absorptions werte bei 450 nm Wellenlänge korrelierten positiv mit der HCPs-Konzentration im Kalibrierung standard und den Proben. Die Konzentration von HCPs in den Proben kann unter Verwendung einer Dosis-Wirkungs-Kurve berechnet werden.