Dieses Kit verwendet einen Festphasen-Enzym-verknüpften Immunosorbent-Assay (ELISA) mit einer Doppelantikörper-Sandwich-Technik, um verbleibende Wirts zell proteine (HCPs) aus HEK293-Zellen in der Probe nachzuweisen. Ein polyklonaler Antikörper, der für HEK293-HCPs spezifisch ist, wurde im Assay verwendet, um alle verbleibenden HCPs in der Probe einzufangen. Gleichzeitig wurden der Mikro titer platte sowohl die Kalibrierung standards (oder die Test probe) als auch die anti-HEK293 HCP-Antikörper markierte HRP (Meerrettich peroxidase) zugesetzt. die mit dem Affinität gereinigten Einfang antikörper beschichtet und gefolgt von Inkubation und Waschen. Dann wurde TMB-Substrat (3,3 ',5,5'-Tetra methyl benzi din) zur Reaktion hinzugefügt, HRP katalysierte die Oxidation von TMB durchH2O2Um ein blaues Produkt zu erzeugen (maximaler Absorptions peak bei 655 nm). Dann wurde die Stop-Lösung hinzugefügt, um die enzymatische Reaktion zu beenden, was zu einem gelb gefärbten Produkt führte (maximaler Absorptions peak bei 450nm). Die Absorptions werte bei der Wellenlänge von 450 nm korrelierten positiv mit der HCPs-Konzentration im Kalibrierung standard und in der Probe. Die Konzentration von HCPs in der Probe kann unter Verwendung der Dosis-Wirkungs-Kurve berechnet werden.
| Komponenten | Versand zustand | Größe der Einheit | Nachweis methode |
| HEK293 HCP Kalibrierung Standard | 2-8 ° c | 96 Tests | Sandwich ELISA |
| Anti-HEK293 HCP-Mikrotiter-Streifen | |||
| Rekonstitution lösung | |||
| Verdünnung | |||
| Wasch puffer Konzentrat (10 ×) | |||
| Anti-HEK293:HRP (100 ×) | |||
| TMB-Substrat | |||
| Stop-Lösung | |||
| Versiegelung folie |
| Linearität & Reichweite | 6-540 ng/mL, R2> 0,990 |
| Genauigkeit | Wieder findungsrate = 96,7%-102,9% |
| LLOQ | 6 ng/mL |
| LOD | 1 ng/mL |
| Präzision | 2,4%-3,7% (CV≤ 20%) |
| Antikörper-Abdeckung (IMBS-2D) | 67,1%-82,8% |
| Antikörper-Abdeckung (IMBS-LC/MS) | 79,7% |
| Spezifität | Keine Kreuz reaktivität mit P.pastoris und Sf9-Zelle. |
| Robustheit | Inkubation bei 25 ± 3 ° C, CV≤ 20% |
| Inkubation geschwindigkeit: 500-600 U/min | |
| Instrumenten tauglichkeit, nicht beschränkt auf Thermo Multis kan FC, MD Spectra Max ABS Micro plate Readers |
SHENTEK®DNA-Proben vorbereitung skit für Rest wirts zellen
SHENTEK®Rest HEK293 DNA Quant iation Kit (3G)
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