E.coli (Protein-Expressions-Stämme) HCP ELISA-Kit

Dieses Kit verwendet einen Festphasen-Enzym-verknüpften Immunosorbent-Assay (ELISA) mit einer Doppelantikörper-Sandwich technik zum Nachweis von Rest-E.coli (Protein expressions stämme) Wirts zell proteine (HCPs) in den Proben. Im Assay wurden für E.coli (Protein expressions stämme)-HCPs spezifischer polyklonaler Antikörper verwendet, um alle verbleibenden HCPs in den Proben einzufangen. Sowohl der Kalibrierung standard als auch die Test proben wurden gleichzeitig der Mikro titer platte zugesetzt, die mit affinität gereinigtem Einfang antikörper beschichtet war, gefolgt von Inkubation und Waschen. Der biotin ylierte Antikörper wurde der Mikro titer platte zugesetzt, um die HCPs zu binden, und dann mit Strept avidin reagiert, das mit HRP (Meerrettich peroxidase) markiert war. TMB-Substrat (3,3',5,5'-Tetra methyl benzi din) wurde zur Reaktion hinzugefügt, HRP katalysierte die Oxidation von TMB durch H₂O₂Um ein blau gefärbtes Produkt zu erzeugen (maximaler Absorptions peak bei 655 nm). Dann wurde die Stop-Lösung hinzugefügt, um die enzymatische Reaktion zu beenden, was zu einem gelb gefärbten Produkt führte (maximaler Absorptions peak bei 450 nm). Die Absorptions werte bei 450 nm Wellenlänge korrelierten positiv mit der HCPs-Konzentration im Kalibrierung standard und den Proben. Die Konzentration von HCPs in der Probe kann unter Verwendung der Dosis-Wirkungs-Kurve berechnet werden.