E.coli (K-12 & alkalische Lyse) HCP ELISA Kit

Anders als bei der herkömmlichen physikalischen Zerfalls technik werden die HCPs in den pDNA-Proben hoch alkalischen Lösungen ausgesetzt und während des Extraktion prozesses denaturiert. was zu einem großen Unterschied in den durch Immun assays gemessenen Detektion sergeb nissen führt. Dieses Kit basiert auf dem Festphasen-Enzym-Linked-Immunosorbent-Assay (ELISA) mit einer Doppelantikörper-Sandwich-Technik zum Nachweis von verbleibenden Wirts zell proteinen (HCPs) aus E.coli-K-12 stämmen. Ein polyklonaler Schaf-Antikörper, der für E.coli-HCPs (K-12 Stämme) spezifisch ist, die durch alkalische Lyse hergestellt wurden, wurde im Assay verwendet, um alle verbleibenden HCPs in der Probe einzufangen. Die Antikörper abdeckung wird nach der aktuellen Mainstream-Methode bewertet. Sowohl die Kalibrierung standards als auch die Test proben wurden gleichzeitig der Mikro titer platte zugesetzt, die mit dem affinität gereinigten Einfang antikörper beschichtet war, gefolgt von Inkubation und Waschen. Der biotin ylierte Antikörper wurde der Mikro titer platte zugesetzt, um die HCPs zu binden, und dann mit mit HRP markiertem Strept avidin (Meerrettich peroxidase) reagiert. TMB-Substrat (3,3',5,5'-Tetra methyl benzi din) wurde zur Reaktion hinzugefügt, HRP katalysierte die Oxidation von TMB durchH₂O₂Um ein blaues Produkt zu erzeugen (maximaler Absorptions peak bei 655 nm). Dann wurde die Stop-Lösung hinzugefügt, um die enzymatische Reaktion zu beenden, was zu einem gelb gefärbten Produkt führte (maximaler Absorptions peak bei 450 nm). Die Absorptions werte bei einer Wellenlänge von 450 nm korrelierten positiv mit der HCPs-Konzentration im Kalibrierung standard und in der Probe. Die Konzentration von HCPs in der Probe kann unter Verwendung der Dosis-Wirkungs-Kurve berechnet werden.