P.pastoris HCP ELISA Kit (einstufiger ELISA)

Dieses Kit basiert auf dem Festphasen-Enzym-Linked-Immunosorbent-Assay (ELISA) mit einer Doppelantikörper-Sandwich-Technik zum Nachweis von Rest-Wirts zell proteinen (HCPs) aus P.pastoris-Zellen. Ein für P.pastoris HCPs spezifischer polyklonaler Schaf antikörper wurde im Assay verwendet, um alle verbleibenden HCPs in der Probe einzufangen. Die Antikörper abdeckung wird nach der aktuellen Mainstream-Methode bewertet. Sowohl der Kalibrierung standard (oder die Test probe) als auch die mit anti-P.pastoris HCP-Antikörper markierte HRP (Meerrettich peroxidase) wurden gleichzeitig der Mikro titer platte zugesetzt, die mit dem affinität gereinigten Einfang antikörper beschichtet war. und gefolgt von Inkubation und Waschen. Dann wurde TMB-Substrat (3,3 ',5,5'-Tetra methyl benzi din) zur Reaktion hinzugefügt, HRP katalysierte die Oxidation von TMB durch H2O2, um ein blau gefärbtes Produkt zu erzeugen (maximaler Absorptions peak bei 655 nm). Dann wurde die Stop-Lösung hinzugefügt, um die enzymatische Reaktion zu beenden, was zu einem gelb gefärbten Produkt führte (maximaler Absorptions peak bei 450 nm). Die Absorptions werte bei 450 nm Wellenlänge korrelierten positiv mit der HCPs-Konzentration im Kalibrierung standard und den Proben. Die Konzentration von HCPs in den Proben kann unter Verwendung einer Dosis-Wirkungs-Kurve berechnet werden.