SHENTEK®Das rcAAV-Quantitations-Kit eignet sich zum qPCR-Nachweis eines replikation kompetenten Adeno-assoziierten Virus (rcAAV) aus geernteter Zellkultur und gereinigtem Bestand. Dieses rcAAV-5/N-Quantitations-Kit wurde für die Quant ifizierung der rcAAV-5/N-Kontamination in Serotypen von rAAV-5/N entwickelt (N steht für mögliche verschiedene Kapsid-Serotypen). Die Proben typen umfassen, ohne darauf beschränkt zu sein, rekombinante Adeno-assoziierte Viren (rAAV) Bulk-und Endprodukte sowie geerntete Proben aus Zellkultur, die für den rcAAV-Nachweis gewünscht werden.
Wichtige Informationen vor der Verwendung dieses Kits:
1. AAV-Serotypen
2. Die invertierte terminale Wiederholung sequenz (ITR) der Prüf probe rAAV muss mit den folgenden Sequenzen übereinstimmen:
ITR-Sequenz von rAAV-5/N
CTCTCCCCCCTGTCGCGTTCGCTCGCTCGCTGGCTCGTTTGGGGGGGTGG
CAGCTCAAAGAGCTGCCAGACGACGGCCCTCTGGCCGTCGCCCCCCCAA
ACGAGCCAGCGAGCGAGCGAACGCGACAGGGGGGAGAGTGCCACACTC
TCAAGCAAGGGGGT
| Komponenten | Versand zustand | Größe der Einheit | Nachweis methode |
| T & R DNA-Kontrolle-5 | -20 ° C | 100 Reaktionen × 2 | Sonde-basierte qPCR |
| RcAAV qPCR-Reaktions puffer | -20 ° C, vor Licht schützen | ||
| Ziel grundierung & Sonde MIX-5 | |||
| Referenz Primer & Sonde MIX-5 | |||
| 100 × ROX | |||
| DNA-Verdünnung puffer (DDB) | |||
| DdH2O | -20 ° C |
| Reichweite | Ziel-5: 2 - 2 × 106Kopien/μL, R2= 0,999, E = 95,3% |
| Referenz-5: 2-2 × 106Kopien/μL, R2= 0,999, E = 94,8% | |
| Genauigkeit | Ziel-5: Erholung = 105,2%-123,7%, Lebenslauf <30% |
| Referenz-5: Erholung = 93,5%-121,5%, Lebenslauf <30% | |
| LOQ | Ziel-5: 2 Kopien/μL |
| Referenz-5: 2 Kopien/μL | |
| LOD | Ziel-5: 4 × 10-1Kopien/μL |
| Präzision | Ziel-5: 7,1%-8,2% (≤ 20%) |
| Referenz-5: 6,5%-9,8% (≤ 20%) | |
| Robustheit | Frost-Tauwetter-Stabilität über 5 Zyklen |
| Instrumenten tauglichkeit, nicht beschränkt auf Thermo-, Biorad-, Roche-, SHENTEK qPCR-Geräte |
SHENTEK®Virus DNA & RNA Extraktion Kit
SHENTEK®RcAAV-2/N-Quantitations-Kit
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