Dieses Kit dient zur Bestimmung des Vorhanden seins von Trypsin-Analogon in biologischen Produkt zubereitung prozessen, die in der Lage sind, Rest enzyme wie TrypLE zu identifizieren™Von Thermo Fisher Scientific, Rekombinant Trypsin von Sartorius und HyrTryp™Von Cytiva.
Trypsin-Analog ist ein hochreines rekombinantes Pilz enzym aus nicht tierischem Ursprung, das aus der Fermentation produktion von Fusarium oxysporum DSM2672 gewonnen wird. Trypsin-Analog spaltet Peptide auf der C-terminalen Seite von Lysin-und Arginin resten wie Standard-Trypsin lösungen, die zur Dissoziation einer Vielzahl von anhaftenden Zellen verwendet werden können. einschl ießlich, aber nicht beschränkt auf HEK293, A549, normale humane epidermale Keratin ozyten (NHEKs) und embryonale Stamm zelle (ESC).
Dieses Kit basiert auf dem Festphasen-Enzym-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) mit einer Doppelantikörper-Sandwich-Technik zum Nachweis von Trypsin-Rest analogon in den Proben. Ein für Trypsin-Analogon spezifischer polyklonaler Schaf antikörper wurde im Assay verwendet, um verbleibendes Trypsin-Analogon in den Proben einzufangen. Gleichzeitig wurden der Mikro titer platte sowohl der Kalibrierung standard (oder die Test probe) als auch der mit HRP (Meerrettich peroxidase) markierte Anti-Trypsin-Analog-Antikörper zugesetzt. die mit dem Affinität gereinigten Einfang antikörper beschichtet und gefolgt von Inkubation und Waschen. Dann wurde TMB-Substrat (3,3 ',5,5'-Tetra methyl benzi din) zur Reaktion hinzugefügt, HRP katalysierte die Oxidation von TMB durch H2O2Um ein blaues Produkt zu erzeugen (maximaler Absorptions peak bei 655 nm). Dann wurde die Stop-Lösung hinzugefügt, um die enzymatische Reaktion zu beenden, was zu einem gelb gefärbten Produkt führte (maximaler Absorptions peak bei 450 nm). Die Absorptions werte bei 450 nm Wellenlänge korrelierten positiv mit der Trypsin-Analog-Konzentration im Kalibrierung standard und den Proben. Die Konzentration von Trypsin-Analog in den Proben kann unter Verwendung der Dosis-Wirkungs-Kurve berechnet werden.
| Komponenten | Versand zustand | Größe der Einheit | Nachweis methode |
| Trypsin-analoger Kalibrierung standard | 2-8 ° c | 96 Tests | Sandwich ELISA |
| Anti-Trypsin-analoge Mikrotiter-Streifen | |||
| Verdünnung | |||
| Wasch puffer Konzentrat (10 ×) | |||
| Anti-Trypsin-analog:HRP (100 ×) | |||
| TMB-Substrat | |||
| Stop-Lösung | |||
| Versiegelung folie |
| Linearität & Reichweite | 0, 16-10, 24 ng/ml, R2> 0,990 |
| Genauigkeit | Wieder findungsrate = 94,0%-99,1% |
| LLOQ | 0,16 ng/mL |
| ULOQ | 10,24 ng/mL |
| Nachweis grenze | 0,0319 ng/mL |
| Wiederholbar keit | 3,6%-4,4% (CV≤ 20%) |
| Spezifität | Keine Kreuz reaktivität mit üblicher weise Protein analoga (e.g., rekombinantes menschliches Trypsin, rekombinantes Rinder trypsin und rekombinantes Schweine trypsin) und gemeinsame technische Zelllinien (e.g., MDCK, CHO, Vero, HEK293, E.coli, P. Pastoris und Sf9 Zellen) |
| Robustheit | Inkubate bei 25 ° C ± 5 ° C, CV≤ 20% |
| Instrumenten tauglichkeit, nicht beschränkt auf Thermo Multis kan FC, Bio-Tek Synergy2 |
SHENTEK®DNA-Proben vorbereitung skit für Rest wirts zellen
E-Mail: Info@shentekbio.com
Telefon:
US Mobile: 1-908-822-3199
US-Büro: 1-800-960-3004 ext 720
China-Büro: 86-400-878-2189
Anschrift:
Standort USA: 3350 Scott Blvd Bldg 6, Santa Clara, CA 95054
Standort in China: No.1366 Hongfeng Straße, Huzhou, Zhejiang, China, 313000